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大发黄金版app客户端多大发黄金版app客户端合成服务订购指南
1. 如何在大发黄金版app客户端订购多大发黄金版app客户端?
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2. 多大发黄金版app客户端溶解
溶解多大发黄金版app客户端是非常复杂的事情,一般很难一下子确定合适的溶剂。通常是先取一点试验,在没有确定合适的溶剂前千万不要全部溶解。
下列方法有助于您选择合适的溶剂:
(1) 判定多大发黄金版app客户端的电荷特定,设定酸性氨基酸Asp(D),Glu(E)和C端COOH为-1;碱性氨基酸Lys(K),Arg(R),His(H)及N端NH2为+1,其它氨基酸的电荷为0。计算出将电荷数。
(2) 如果净电荷数>0,多大发黄金版app客户端为碱性,用水溶解:如果不溶解或溶解性不大,加入醋酸(10%以上);如果多大发黄金版app客户端还不能溶解,加入少量TFA(25ul)溶解,然后加入500ul水稀释。
(3) 如果净电荷数<0,多大发黄金版app客户端为酸性,用水溶解;如果不溶解或溶解性不大,加入氨水(25ul)溶解,然后加入500ul水稀释。
(4) 如果净电荷数=0,多大发黄金版app客户端为中性,含有大量不带电荷的极性氨基酸残基或疏水性氨基酸的疏水性多大发黄金版app客户端和中性多大发黄金版app客户端可先溶解于少量有机溶剂中,如DMSO、DMF、醋酸、乙腈、甲醇、丙醇或异丙醇,然后加水(蒸馏水)稀释。含有甲硫氨酸或半胱氨酸的多大发黄金版app客户端不能用DMSO溶解,因为DMSO可能造成侧链氧化。还有人建议需要尿素来溶解。对于含有自由半胱氨酸的大发黄金版app客户端,需使用DMF而不是DMSO。对于疏水性很大的多大发黄金版app客户端,可添加6M盐酸胍或8M尿素,然后进行必要的稀释。
为了防止或尽量减少多大发黄金版app客户端降解,请将多大发黄金版app客户端以冻干粉形式保存在-20°C或更低温度更佳。如果需要保存溶液大发黄金版app客户端,最好分成小样存放,以避免反复冻融。一份样品融冻后未用完,应扔掉。细菌降解有时会成为溶液大发黄金版app客户端的麻烦,所以请将大发黄金版app客户端溶于无菌水或大发黄金版app客户端溶液过滤除菌。
碱性氨基酸:Lys(K), Arg(R), His (H) , Orn
酸性氨基酸: Asp(D), Glu(E),
3. 一个大发黄金版app客户端段是否可溶能预测吗?
大发黄金版app客户端无法通过研究多大发黄金版app客户端的结构来预测其在水中的溶解度。大发黄金版app客户端不能保证最终产品在水中,或者其他溶剂中的溶解性。
然而,赖氨酸的ε-氨基和精氨酸的胍通常有助于预测溶解度,尤其是短大发黄金版app客户端。与此相反,含有天门冬氨酸和谷氨酸的酸性大发黄金版app客户端往往是不易溶于水的,但易溶于稀氨水或碱性缓冲液。
4. 多大发黄金版app客户端的纯度(HPLC)及多大发黄金版app客户端含量(Peptide Content)
多大发黄金版app客户端的纯度(HPLC)及多大发黄金版app客户端含量(Peptide Content)意义不同,订购多大发黄金版app客户端之前需要明确。
案例:1g 多大发黄金版app客户端 HPLC 98% 纯度, 80% 多大发黄金版app客户端含量,水含量10%,TFA含量10%
称重:1g
多大发黄金版app客户端部分:800mg 【其中784mg 是目的多大发黄金版app客户端(多大发黄金版app客户端部分的 98%),16mg 是其他大发黄金版app客户端杂质 (多大发黄金版app客户端部分的 2%)】
水部分:100mg
盐部分: TFA 100mg
一般订购多大发黄金版app客户端纯度指标,指的是HPLC纯度。
具体解释:
多大发黄金版app客户端的纯度是指HPLC方法在220nm处检测到的目标多大发黄金版app客户端的含量(220nm是大发黄金版app客户端链的吸收波长),紫外分光光度计检测不到水和残留的盐不。可发现其他的杂质包括:缺失序列(缺失了一个或多个氨基酸残基的靶序列),截断序列(加帽过程中产生的序列)脱保护不完全序列(产生于整个合成过程或最后的裂解过程)。
多大发黄金版app客户端纯化不涉及水和盐。HPLC纯化会产生少量的TFA(三氟乙酸),如:游离的氨基末端和其他侧链如Arg、Lys、His都可生成少量TFA杂质。通常交付的多大发黄金版app客户端多含有微量TFA和残留水。即使处于冻干状态,水也会因共价结合的能力不同而不同程度地存在着。
纯化前的多大发黄金版app客户端中包含的杂质包括多大发黄金版app客户端和非多大发黄金版app客户端物质, 纯化后的多大发黄金版app客户端中包含的杂质除了TFA盐,大多数为序列被修改的多大发黄金版app客户端。
a.缺失了一个或多个氨基酸残基的靶序列
b.为避免缺失序列的产生而进行的加帽操作,截断序列即产生于加帽过程中
c. 产生于整个合成过程或最后的裂解过程
如果对盐有特殊要求,请在询价时,明确一下(脱盐,转成醋酸盐 等)。如果不注明,做成的多大发黄金版app客户端都是TFA(三氟乙酸)盐形式。
注意,大发黄金版app客户端使用的HPLC 测试体系如下:
Solvent A: 0.1%Trifluoroacetic in 100% Acetonirile
Solvent B: 0.1%Trifluoroacetic in 100% Water
Flow rate:1.0ml/min
Wavelength:220nm
色谱柱:C18 反相柱
如果您有特殊的分析条件(色谱条件),请在订购之前告知,大发黄金版app客户端将和商讨。如果您没有特殊要求,大发黄金版app客户端的测试条件就是上述常用的体系。
多大发黄金版app客户端含量(Peptide Content)是指与非大发黄金版app客户端物质(主要为抗衡离子和水)相比的多大发黄金版app客户端量。可通过氨基酸分析来确定大发黄金版app客户端净含量。如果您需要这项服务请在订单上明确。
5. 大发黄金版app客户端如何对合成的多大发黄金版app客户端进行质检?
产品将附完整的检测报告,包括:HPLC图谱;质谱;合成报告(COA)。
(如有特殊需要,可提供核磁,红外,紫外,元素分析,水分含量测定以及氨基酸分析服务,这些服务需要另外收费)
6. 大发黄金版app客户端对合成的多大发黄金版app客户端提供分装服务吗?
根据要求,本公司每个样品可以在10管以内免费分装,如果需要分装更多管数,超过10管部分,每管加收8元。由于少量分装可以避免多次反复冻融,减少容器的开盖和闭合的次数,减少处理不当或细菌污染的机会,让您的多大发黄金版app客户端更加稳定。
7.定制多大发黄金版app客户端的活性能保证吗?
定制多大发黄金版app客户端的活性受多个因素的影响。大发黄金版app客户端能保证的是产品的序列正确 (Mass 结果保证),纯度达标(HPLC 结果保证)。 对于活性,由于没有专门的测试方法,所以不能保证。
有几个因素可能对确保活性有所帮助:
A. 一般完工的定制多大发黄金版app客户端为TFA 盐形式,如果客户需要研究多大发黄金版app客户端的电荷等情况,需要要求将多大发黄金版app客户端脱盐。
B. 一般完工的定制多大发黄金版app客户端为TFA 盐形式, 有的客户会要求将其转为醋酸盐。
8. 定制的多大发黄金版app客户端能保证多大发黄金版app客户端在特定溶液中的溶解性吗?
大发黄金版app客户端无法通过研究多大发黄金版app客户端的结构来预测其在水中的溶解度。大发黄金版app客户端不能保证最终产品在水中,或者其他溶剂中的溶解性。
然而,赖氨酸的ε-氨基和精氨酸的胍通常有助于预测溶解度,尤其是短大发黄金版app客户端。与此相反,含有天门冬氨酸和谷氨酸的酸性大发黄金版app客户端往往是不易溶于水的,但易溶于稀氨水或碱性缓冲液。
如果订购多大发黄金版app客户端超过10mg 的话,大发黄金版app客户端可以测试室温条件下1mg多大发黄金版app客户端在0.5~1ml DMF,水中的溶解情况,
9.多大发黄金版app客户端保存
多大发黄金版app客户端一般长期保存需要避光保存,并应保存在-20度以下,-80°C效果更好,短期可以保存在4℃。可以短时间以室温运输。多大发黄金版app客户端在-20℃或更低温度很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中时。
在打开包装和称重前,请先将多大发黄金版app客户端在干燥器中平衡至室温,未经平衡到室温的多大发黄金版app客户端在打开盖子后易有水份凝结,会降低了多大发黄金版app客户端产品的稳定性。
含有Cys, Met or Trp的多大发黄金版app客户端容易氧化,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多大发黄金版app客户端容易空气氧化, 在封瓶前,氮气或氩气保护会降低氧化作用。含Gln或Asn的多大发黄金版app客户端比较容易降解,所有这些大发黄金版app客户端与不含这些有问题的简单大发黄金版app客户端相比,保存期要短。
对N端第一个氨基酸是Gln的的多大发黄金版app客户端非常不稳定,几天内会发生降解,建议在设计序列时,不让Gln在N端出现。
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